Text
Purifikasi dan pencirian enzim protease fibrinolitik dari ekstrak jamur merang
Jamur merang ( Volvariela volvaceae) merupakan jamur pangan yang secara empiris diduga dapat melancarkan peredaran darah sehubungan dengan kandungan enzim fibrinolitik yang dimilikinya. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan enzim protease murni yang bersifat fibrinolitik dan penciriannya dari ekstrak jamur merang. Pemurnian dilakukan secara bertahap, yaitu presipitasi amonium sulfat 75% dialisis dengan menggunakan membran dialisis (cutoff 10 kDa), dan kromatografi pertukaran ion dengan matriks DEAE Sepharose. Fraksi eluat DEAE-Sepharose aktif mempunyai dua subunit protein dengan bobot molekul 12,9 dan 15,8 kDa. Eluat memiliki aktivitas spesifik 0,383 U/mg dengan tingkat kemurniannya mencapai 2,7 kali lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak kasarnya. Analisis pencarian enzim dilakukan terhadap ekstrak kasar dan eluat murni. Aktivitas ekstrak kasar dan eluat mencapai optimum pada suhu 50 ? dan pH 7 dengan waktu inkubasi 10 menit. Pada kondisi optimum, aktivitas protease eluat lebih besar daripada ekstrak kasarnya. Enzim dihambat kuat oleh inhibitor fenilmetilsulfoni fluorida dan N-p-tosil-L-lisinklorometil keton yang menunjukkan golongan protease serin. Profil zimografi fibrin memperlihatkan bahwa enzim mampu mendegradasi substrat fibrin. Hasil ini membuktikan bahwa ekstrak dan eluat protease murni dari jamur merang (V. volvaceae) mempunyai aktivitas fibrinolitik yang potensial dan dapat dimanfaatkan sebagai alternatif terapi trombolitik.
Tidak ada salinan data
Tidak tersedia versi lain