Text

Troubleshooting in expression and purification of recombinant severe acute respiratory syndrome-associated corona virus nucleocapsid protein in escherichia coli BL 21

---

Considerring pentingnya N protein untuk studi patogenesis virus atau pengembangan immunodiagnostic assay, kami melaporkan efek dari beberapa kondisi pada kemurnian dan keseragaman rekombinan SARS-CoV N protein dinyatakan dalam BL21 E. coli. Gen SARS-CoV N adalah trancribed terbalik dan diperkuat oleh transkripsi-polimerase reverse reaksi berantai (RT-PCR) teknik. Amplicons ke pGEX - 6P 1 kloning dan diikuti oleh subcloning gen target ke berpengalaman - 80L. Setelah memasukkan plasmid rekombinan (pQE80-N) ke E. coli, protein rekombinan (6 × nya fusi protein tag-N) dinyatakan dengan merangsang bakteri sel dengan 0,1-0,5 mM isopropy1-1-thio-D-galactopyranoside (IPTG) selama 1-5 h. Protein rekombinan diekstraksi dari sel-sel bakteri oleh NTT buffer yang mengandung 0-20 mM imidazol, dan diikuti oleh Ni-NTA afinitas resin pemurnian. Hasilnya menunjukkan bahwa induksi E. coli BL21 dengan 0.2 mM IPTG selama 4 h dan diikuti dengan lysis sel-sel bakteri di NTT buffer yang mengandung 10 mM imidazol sangat kondisi yang optimal untuk mendapatkan protein SARS-CoV N rekombinan murni.

---

Ketersediaan

Tidak ada salinan data

Informasi Detail

Judul Seri

Makara seri sains

No. Panggil

-

Penerbit

: American foundations information service., 2010

Deskripsi Fisik

-

Bahasa

Indonesia

ISBN/ISSN

1693-6671

Klasifikasi

-

Tipe Isi

-

Tipe Media

-

Tipe Pembawa

-

Edisi

Vol. 14, No. 02, Tahun

Subjek

-

Info Detail Spesifik

-

Pernyataan Tanggungjawab

-

Versi lain/terkait

Lampiran Berkas

Komentar

---

Anda harus masuk sebelum memberikan komentar